Cas9 tìm đúng chỗ nhờ 20 nucleotide trên RNA dẫn đường, nhưng chỉ cắt khi ngay cạnh đích có một đoạn PAM ngắn; thiếu PAM thì trình tự khớp hoàn hảo vẫn không bị đụng tới. Sau vết cắt sợi đôi, hai lối vá dẫn tới hai kết quả khác hẳn nhau: NHEJ nối ẩu nên thường làm hỏng gen, còn HDR chép theo mạch khuôn nên chèn được đúng đoạn mong muốn. Rủi ro lớn nhất là cắt nhầm, khi RNA dẫn đường bám vào một đoạn gần giống nằm ở chỗ khác trong bộ gen.
Cas9 tìm đúng chỗ nhờ 20 nucleotide trên RNA dẫn đường, nhưng chỉ cắt khi ngay cạnh đích có một đoạn PAM ngắn; thiếu PAM thì trình tự khớp hoàn hảo vẫn không bị đụng tới. Sau vết cắt sợi đôi, hai lối vá dẫn tới hai kết quả khác hẳn nhau: NHEJ nối ẩu nên thường làm hỏng gen, còn HDR chép theo mạch khuôn nên chèn được đúng đoạn mong muốn. Rủi ro lớn nhất là cắt nhầm, khi RNA dẫn đường bám vào một đoạn gần giống nằm ở chỗ khác trong bộ gen.
Chủ đề liên quan trong Tế bào & Di truyền