MÔ PHỎNG PCR & GIẢI TRÌNH TỰ

Ba mươi chu kỳ nóng lạnh biến một bản DNA thành cỡ một tỉ bản, vì mỗi vòng lại nhân đôi số bản theo luỹ thừa 2ⁿ. Chỗ khó của kỹ thuật nằm ở nhiệt gắn mồi quanh mốc 55 độ: đặt thấp quá thì mồi bám cả những đoạn gần giống, đặt cao quá thì mồi chẳng bám nổi đâu cả. Cũng vì khuếch đại mạnh như vậy mà nhiễm chéo thành ca dương tính giả kinh điển, chỉ vài phân tử lạc vào ống cũng được nhân lên thành tín hiệu rõ ràng. Bản nhân xong thì đọc ra được từng base A T G C.

▸ Nạp DNA khuôn & cặp mồi xuôi/ngược…
▸ Pha Taq polymerase chịu nhiệt + dNTP
▸ Hiệu chỉnh chu kỳ nhiệt 95° / 55° / 72°C
▸ Lắp đầu đọc giải trình tự Sanger 4 màu
▸ Sẵn sàng — Trực tuyến. ✅
0%
⌂ Tế bào

Phòng mô phỏng PCR & Giải trình tự gen

Polymerase Chain Reaction · Sequencing
Trực tuyến
×2 mỗi chu kỳ · 2ⁿ
Nhiệt khối & nhân bản
🔬 Chu kỳ nhiệt PCR
kim trắng = nhiệt mục tiêu
Bước hiện tại—
Nhiệt khối—
Chu kỳ—
Số bản đích (~2ⁿ)—
Nhiệt gắn mồi—
Base đọc được—
Ghi chú
PCR lặp 3 bước: biến tính 95°C tách mạch → gắn mồi ~55°C → kéo dài 72°C (Taq). Mỗi chu kỳ số bản đích ×2 → sau n chu kỳ ≈ 2ⁿ bản. Chỉ đoạn giữa 2 mồi được nhân chọn lọc.
—
Chỉnh NHIỆT GẮN MỒI & SỐ CHU KỲ ở cột phải · chọn kịch bản (Tua 2ⁿ · Giải trình tự · Gel · qPCR) · bấm “Sơ đồ chu kỳ” xem 3 bước
Trình duyệt chưa bật canvas — không dựng được mô phỏng.
Số bản DNA đích theo chu kỳ (log) khuếch đại 2ⁿ
Về PCR & Giải trình tự gen

Ba mươi chu kỳ nóng lạnh biến một bản DNA thành cỡ một tỉ bản, vì mỗi vòng lại nhân đôi số bản theo luỹ thừa 2ⁿ. Chỗ khó của kỹ thuật nằm ở nhiệt gắn mồi quanh mốc 55 độ: đặt thấp quá thì mồi bám cả những đoạn gần giống, đặt cao quá thì mồi chẳng bám nổi đâu cả. Cũng vì khuếch đại mạnh như vậy mà nhiễm chéo thành ca dương tính giả kinh điển, chỉ vài phân tử lạc vào ống cũng được nhân lên thành tín hiệu rõ ràng. Bản nhân xong thì đọc ra được từng base A T G C.

Chủ đề liên quan trong Tế bào & Di truyền